一、实验目的

（1）掌握日本血吸虫的生活史、感染阶段、感染方式、致病机制。

（2）了解寄生虫动物实验的实验方式。

二、实验材料

（1）健康小鼠。

（2）感染日本血吸虫尾蚴的钉螺。

（3）麻醉剂：水合氯醛

（4）无水乙醇（用于灭活载玻片上可能残存的尾蚴）、生理盐水（用于盛放已经感染的血吸虫，便于观察）、去氯水（用于诱导尾蚴从钉螺内逸出）等。

三、实验方法

1、诱导尾蚴逸出

（1）向六孔细胞培养版内加入去氯水至容量的三分之二。

（2）用弯头镊夹取6~10个钉螺至六孔生物培养板，加入适当去氯水。

（3）静置20分钟后，在显微镜下确认尾蚴的逸出情况。

2、小鼠预处理

（1）抓取实验组小鼠，固定后腹部备皮。

（2）用蘸有去氯水的面前擦拭小鼠腹部皮肤。（目的：为尾蚴感染提供水环境）

3、感染小鼠

（1）点燃酒精灯，用灭菌后的接种环挑取六孔细胞培养板中水面液体，转移至盖玻片上。

（2）将盖玻片置于小鼠腹部皮肤上20分钟，随后将盖玻片浸入无水乙醇中，以消灭残存的尾蚴。

（3）将小鼠放回笼中，继续培养40天左右。

4、实验观察（小鼠解剖）

（1）取出小鼠，在左下腹部注射水合氯醛以麻醉小鼠。

（2）对小鼠进行摘眼球取血，便于清晰观察小鼠肝门静脉-肠系膜静脉中的血吸虫成虫。

（3）处死小鼠并固定后，暴露脏器，观察小鼠各器官的病理变化。

（4）用注射器针头扎破肝门静脉，观察其内的血吸虫成虫。将成虫挑出并置于生理盐水中，以进一步观察血吸虫的形态。

四、实验结果

（1）与正常小鼠对比，可观察到肝部出现虫卵肉芽肿，脾明显肿大、结肠呈串珠样。

（2）肝门静脉内可见血吸虫成虫。

五、实验分析与实验讨论

（1）钉螺是血吸虫的唯一中间宿主，在水环境中可以通过皮肤接触感染终宿主。

（2）血吸虫感染终宿主后主要寄生于终宿主的肝门静脉-肠系膜静脉，其致病阶段主要为虫卵，引起肝脏虫卵肉芽肿、门静脉高压、脾肿大和结肠串珠样等。